研究小鼠焦虑行为的方法有很多，其中行为学实验之高架十字迷宫任务是一种评估啮齿动物类焦虑行为比较经典的一种方法。

该测试是在具有两个张开和两个闭合臂的加号形装置上进行的，正式实验开始时，允许动物自由探索迷宫5分钟，同时记录进入张开和闭合臂的持续时间和频率。

该任务基于一种接近—回避冲突，这意味着该动物面临着探索新环境的倾向与对高处和开放空间的无条件恐惧之间的斗争。因此，与对照动物相比，类似焦虑状态的特征是张开臂回避增加。

设施准备

1.高架十字迷宫

2.工业相机（放置在迷宫正上方）

3.间接白光

4.数字照度计

5.动物行为学分析软件

实验方法

1. 迷宫所处位置应远离噪音、气味等外来干扰。您可以选择在行为实验室内放置一个低强度白噪声源，来缓解小鼠的焦虑。引导线索，例如房间周围墙壁上的图画，可能会使动物的活动偏向迷宫的某个区域。因此，必须移除任何可能用作提示的绘画或人工制品。实验者在整个实验过程中不要发出任何过度的噪音或移动，也不要产生刺激性气味，因为它可能对小鼠产生焦虑刺激。

2. 房间内的照明必须保持恒定并根据要执行的分析进行控制。鉴于低强度光度会减少张开臂的回避，而抗焦虑效果应该在更高强度的照明下进行，所以要根据不同的分析目的选择对应的强度照明。

3. 将这些实验条件调整至标准后，动物将被带入实验室，在笼中放置45至60分钟，让其从移动的应激中恢复。

4 在开始测试之前，用70%乙醇清洁迷宫，以清除设备上积聚的任何污垢或气味。

5. 打开摄像机，将第一只小鼠放在迷宫的中心正方形中，面对一个张开的臂，最好是与实验者相对的那个。

6. 实验者将站在离迷宫尽可能远的地方，并在实验动物看不见的地方， 如有必要，站在房间外面。

7. 自由探索5分钟后，老鼠会被移出迷宫并回到它的笼子里。

8. 清除所有尿液和粪便，并用70%乙醇彻底清洁迷宫，以去除第一只小鼠的任何残留气味。之后，可以将下一只小鼠提交给测试。

9. 重复步骤 5-8，直到所有动物都经过测试。

10. 录制的视频可以通过自动计算机软件进行分析。

分析参数

1.进入闭合臂中的条目和闭合臂中花费的时间：整个实验过程中迷宫上总运动的测量。

2.进入张开双臂的条目和张开双臂花费的时间：可用作焦虑的逆向测量，也就是说，减少张开双臂回避反映了较低水平的焦虑。

3.风险评估行为：低头的频率、持续时间（进入张开双臂时头部向地板向下移动）和伸展姿势（头部伸展姿势，两只或三只爪子放在张开的臂上， 退回到以前的位置）可以直接衡量焦虑，即风险评估行为的增加表明焦虑水平较高。

4.如果小鼠在测试过程中从张开的臂上掉下来，实验者必须立即将其捡起并放回张开的臂上。在进行实验分析时应注意并考虑这一点，这种动物可以从最终分析中排除。

5.只有当动物将四只爪子都放在中心方块外并放在其中一个臂上时，才会考虑进入张开或闭合的臂。然而，从给定的臂伸出两只爪子，已经足以停止计算在臂上花费的时间。如果动物用这两只爪子返回臂，则应继续计时，但不会记录任何条目。